Rendimiento para suprimir la adsorción no específica
BIOLIPIDURE® puede suprimir eficazmente la adsorción no específica de proteínas en microplacas o perlas magnéticas. Se realizaron tres experimentos para demostrar la capacidad de BIOLIPIDURE® para suprimir la adsorción no específica de proteínas.
[ Mediante recubrimiento de microplacas ]
- La placa de 8 pocillos MaxiSorp (Thermo Fisher Scientific) se bloqueó con BIOLIPIDURE® diluido 10 veces (0,5 % en peso final, diluido con PBS).
- La placa se aspiró y se secó durante la noche a temperatura ambiente.
- Se añadió IgG de cabra anti-ratón marcada con HRP y se incubó durante 1 hora a temperatura ambiente.
- Lavado con PBS-T.
- Se añadió el sustrato colorimétrico (TMB) y se dejó reaccionar durante 10 min a temperatura ambiente.
- Se añadió la solución de detención (ácido sulfúrico), seguida de la medición de Abs. a 450 nm.
[ Mediante recubrimiento de perlas magnéticas ]
- 8,5 µg de perlas magnéticas (MagnosphereTM MX100, JSR) se suspendieron en 100 µL de TBS que contenía BIOLIPIDURE® diluido 10 veces (0,5 % en peso final).
- Después de 1 hora de incubación a temperatura ambiente, las perlas se lavaron con TBS.
- Se añadió TBS que contenía 10 ng de IgG de cabra anti-humana marcada con AP, y se incubó 1 hora a temperatura ambiente, seguido de lavado con TBS-T.
- Se añadió el sustrato quimioluminiscente (CDP-Star, Roche).
[ Aplicación a CLEIA tipo sándwich, ensayo basado en microplacas ]
- El anticuerpo monoclonal anti-IgG humana de ratón se inmovilizó en una placa de 8 pocillos MaxiSorp(TM) (Thermo Fisher Scientific).
- La placa se lavó con TBS.
- Se añadió BIOLIPIDURE® diluido 10 veces (0,5 % en peso, diluido con TBS), seguido de 1 hora de incubación a temperatura ambiente.
- Se añadió el estándar de IgG humana, seguido de 1 hora de incubación a temperatura ambiente.
- La placa se lavó con TBS-T.
- Se añadió el anticuerpo policlonal anti-IgG humana de cabra marcado con AP, seguido de 1 hora de incubación a temperatura ambiente.
- La placa se lavó con TBS-T.
- Se añadió el sustrato quimioluminiscente (CDP-Star, Roche) y se dejó reaccionar durante 15 min a temperatura ambiente para medir la unidad de luz relativa (RLU).
BIOLIPIDURE® mejoró significativamente la intensidad de la señal en CLEIA tipo sándwich.
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